昆虫杆状病毒表达系统

昆虫杆状病毒表达系统

艾普蒂昆虫杆状病毒表达系统:真核蛋白精准表达的平台

一、技术优势:突破哺乳动物系统局限的六大特性

艾普蒂基于技术平台,整合第三代重组杆状病毒技术,实现复杂蛋白的高效表达与精准修饰,满足药物开发与工业生产的双重需求‌。

1. 高效分泌能力

1.  胞外分泌效率达70%-90%,显著降低纯化难度‌

2.  单次感染可收获目标蛋白5-800 mg/L(哺乳动物系统的3-8倍)‌

2. 精准翻译后修饰

1.  糖基化修饰与哺乳动物系统相似度达75%‌

2.  二硫键正确形成率>98%,磷酸化修饰准确率>90%‌

3. 多基因共表达能力

1.  单个载体可同时表达4种外源基因‌

2.  案例:成功表达含Fc融合蛋白的三聚体复合物‌

4. 无血清培养兼容性

1.  支持SF900 III/SFM培养基悬浮培养‌

2.  细胞密度可达8×10⁶ cells/mL(贴壁培养的10倍)‌

5. 生物安全保障

1.  病毒不感染脊椎动物,符合实验室标准‌

2.  无内毒素风险

6. 大规模生产优势

1.  500L生物反应器单批次产量达200-500 g‌

2.  生产成本较HEK293系统降低40%-60%‌

 

二、服务流程:从基因到成品的全周期开发

艾普蒂建立14步标准化开发路径,项目成功率>88%‌

阶段1:基因设计与载体构建(5-7天)

• 密码子优化覆盖12种鳞翅目昆虫偏好性‌

• 多角体蛋白(polh)与p10双启动子协同调控‌

阶段2:病毒重组与筛选(8-10天)

• 重组效率>99%(基于Tn7转座系统)‌

• 空斑分析法纯化病毒,滴度>1×10⁸ PFU/mL‌

阶段3:细胞培养与感染(7-14天)

• 感染复数(MOI)优化范围0.1-10‌

• 在线监测细胞活力(>85%时启动收获)‌

阶段4:下游纯化(5-7天)

• 三步层析工艺:亲和→离子交换→分子筛‌

• 超滤浓缩系统控制终浓度(0.1-50 mg/mL

阶段5:质量验证与交付

• 基础检测:SDS-PAGE、Western Blot、HPLC‌

• 高级检测:糖型质谱分析、生物活性验证‌

 

三、应用领域:覆盖生物医药全产业链

1. 细胞治疗蛋白

1.  CAR-T细胞衔接蛋白正确折叠率>97%‌

2.  案例:双特异性抗体产量提升至1.2 g/L‌

2. 科研试剂定制

1.  提供His标签、GST标签等8种标记系统‌

2.  冻干制剂常温保存稳定性>36个月‌

 

四、成功案例:全球客户的工业化验证

生物制药合作

• 某CAR-T疗法开发公司

 需求:表达含4个跨膜结构域的衔接蛋白

 成果:获得高活性蛋白(EC50=0.3 nM)

科研机构合作

大学结构生物学中心

1.  目标:解析G蛋白偶联受体三维结构

2.  成果:获得2.5Å分辨率冷冻电镜数据,发表于《Cell》‌

 

五、质量体系:国际标准下的全流程管控

生产过程控制

1.  关键参数偏差控制:细胞存活率波动<±3%‌

1.  培养温度偏差<±0.3℃‌

交付质量标准

1.  基础级:纯度>90%(SDS-PAGE),内毒素<1 EU/mg‌

2.  GMP级:符合ICH Q5D规范,宿主蛋白残留<10 ppm‌

客户权益保障

1.  技术转移:提供完整SOP与工艺验证文件‌

2.  售后支持:免费12个月存储稳定性跟踪‌

 

选择艾普蒂的核心价值

1.  累计完成1200+杆状病毒表达项目‌

2.  服务全球30个国家客户‌

立即启动合作

1.  提交蛋白序列信息,24小时内获取工艺开发方案。

2.  免费密码子优化服务

3.  优先获得中试生产档期