艾普蒂昆虫杆状病毒表达系统:真核蛋白精准表达的平台
一、技术优势:突破哺乳动物系统局限的六大特性
艾普蒂基于技术平台,整合第三代重组杆状病毒技术,实现复杂蛋白的高效表达与精准修饰,满足药物开发与工业生产的双重需求。
1. 高效分泌能力
1. 胞外分泌效率达70%-90%,显著降低纯化难度
2. 单次感染可收获目标蛋白5-800 mg/L(哺乳动物系统的3-8倍)
2. 精准翻译后修饰
1. 糖基化修饰与哺乳动物系统相似度达75%
2. 二硫键正确形成率>98%,磷酸化修饰准确率>90%
3. 多基因共表达能力
1. 单个载体可同时表达4种外源基因
2. 案例:成功表达含Fc融合蛋白的三聚体复合物
4. 无血清培养兼容性
1. 支持SF900 III/SFM培养基悬浮培养
2. 细胞密度可达8×10⁶ cells/mL(贴壁培养的10倍)
5. 生物安全保障
1. 病毒不感染脊椎动物,符合实验室标准
2. 无内毒素风险
6. 大规模生产优势
1. 500L生物反应器单批次产量达200-500 g
2. 生产成本较HEK293系统降低40%-60%
二、服务流程:从基因到成品的全周期开发
艾普蒂建立14步标准化开发路径,项目成功率>88%
阶段1:基因设计与载体构建(5-7天)
• 密码子优化覆盖12种鳞翅目昆虫偏好性
• 多角体蛋白(polh)与p10双启动子协同调控
阶段2:病毒重组与筛选(8-10天)
• 重组效率>99%(基于Tn7转座系统)
• 空斑分析法纯化病毒,滴度>1×10⁸ PFU/mL
阶段3:细胞培养与感染(7-14天)
• 感染复数(MOI)优化范围0.1-10
• 在线监测细胞活力(>85%时启动收获)
阶段4:下游纯化(5-7天)
• 三步层析工艺:亲和→离子交换→分子筛
• 超滤浓缩系统控制终浓度(0.1-50 mg/mL
阶段5:质量验证与交付
• 基础检测:SDS-PAGE、Western Blot、HPLC
• 高级检测:糖型质谱分析、生物活性验证
三、应用领域:覆盖生物医药全产业链
1. 细胞治疗蛋白
1. CAR-T细胞衔接蛋白正确折叠率>97%
2. 案例:双特异性抗体产量提升至1.2 g/L
2. 科研试剂定制
1. 提供His标签、GST标签等8种标记系统
2. 冻干制剂常温保存稳定性>36个月
四、成功案例:全球客户的工业化验证
生物制药合作
• 某CAR-T疗法开发公司
● 需求:表达含4个跨膜结构域的衔接蛋白
● 成果:获得高活性蛋白(EC50=0.3 nM)
科研机构合作
• 某大学结构生物学中心
1. 目标:解析G蛋白偶联受体三维结构
2. 成果:获得2.5Å分辨率冷冻电镜数据,发表于《Cell》
五、质量体系:国际标准下的全流程管控
生产过程控制
1. 关键参数偏差控制:细胞存活率波动<±3%
1. 培养温度偏差<±0.3℃
交付质量标准
1. 基础级:纯度>90%(SDS-PAGE),内毒素<1 EU/mg
2. GMP级:符合ICH Q5D规范,宿主蛋白残留<10 ppm
客户权益保障
1. 技术转移:提供完整SOP与工艺验证文件
2. 售后支持:免费12个月存储稳定性跟踪
选择艾普蒂的核心价值
1. 累计完成1200+杆状病毒表达项目
2. 服务全球30个国家客户
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1. 提交蛋白序列信息,24小时内获取工艺开发方案。
2. 免费密码子优化服务
3. 优先获得中试生产档期