无细胞蛋白表达服务
无细胞蛋白表达系统突破了活细胞生长和代谢的限制,在体外开放体系中实现蛋白的快速、高效合成。该系统具备反应条件高度可控、表达周期短、成功率高等优势,尤其适用于毒性蛋白、难表达蛋白及非天然氨基酸标记蛋白的制备。 无细胞表达无需细胞培养与传代,可在数小时至数天内获得目标蛋白,大幅缩短项目周期;同时体系灵活,可进行多参数并行优化,提升表达效率与可重复性,是高难度重组蛋白快速获取的理想解决方案。
客户提供目的蛋白序列,以及稀有密码子、密码子偏好性等因素进行分析优化
提供蛋白序列分析报告以及正式的定制服务合同
对合成的基因进行测序验证,克隆表达载体中
质粒测序报告
无细胞蛋白合成及纯化,分析SDS-PAGE
纯化蛋白样品以及表达评估报告(SDS-PAGE)
二次纯化
• 标签移除
• 内毒素清除
• 蛋白质标记
• 活性测定
• 蛋白质分析
交付符合的需求的蛋白
• QC撰写COA报告
围绕不同项目需求,进一步拓展服务内容,涵盖 • 内毒素去除服务 • 标签去除服务 • 蛋白标记服务 • 蛋白亲和力检测服务 • 蛋白突变服务
无细胞蛋白表达(Cell-Free Protein Expression, CFPE)直接基于体外转录翻译体系(In vitro Transcription–Translation, TX–TL),彻底脱离活细胞生长与代谢依赖。 该体系避免了宿主毒性(Host toxicity)、代谢负担(Metabolic burden)及蛋白降解(Proteolysis)等细胞内限制,对毒性蛋白、调控蛋白及不稳定蛋白尤为友好。
从 DNA 模板到蛋白产物仅需数小时级反应时间(hours-scale reaction),无需菌株构建、细胞扩增或诱导培养(Induction & fermentation)。 该特性非常适合快速表达验证(Rapid feasibility screening)、功能初筛(Functional screening)及高通量研发场景。
无细胞体系支持 DNA 模板、表达标签(Fusion tags)、反应组分的模块化组合(Modular design)。 可快速并行测试不同表达策略,广泛应用于方案比选(Strategy comparison)与条件优化(Condition optimization)。
体系中不含复杂的宿主内源蛋白背景(Low background proteome),非特异性干扰显著降低。 所得蛋白更适合直接用于 酶活检测(Enzymatic assay)、分子互作分析(Protein–Protein Interaction, PPI)及抗体筛选(Antibody screening)。
什么是无细胞蛋白表达系统?适合做什么项目?
无细胞蛋白表达系统是指在体外使用细胞裂解液(或重组体系)来完成转录与翻译,从而快速合成目标蛋白,不需要建立活细胞培养过程。它最大的特点是速度快、流程灵活、对“难表达蛋白”更友好。
这种体系尤其适合高通量筛选、早期验证、毒性蛋白表达、膜蛋白/复杂蛋白表达探索、快速获得少量蛋白用于实验等场景,能显著缩短从基因到蛋白的周期。
无细胞表达相比大肠杆菌/哺乳动物表达,优势是什么?
无细胞表达最大的优势在于不受细胞生长限制,因此对一些在细胞内表达会影响宿主生长的蛋白(例如毒性蛋白、酶类、强活性蛋白)更容易成功。
同时它的实验条件可控性强,可以快速调整模板、反应体系、添加辅因子或改变氧化还原环境,实现“快速试错与优化”。对于需要快速验证多个构建或多个突变体的项目,无细胞系统在效率上非常有优势。
无细胞表达的蛋白有没有翻译后修饰?能做糖基化吗?
无细胞表达系统是否具备翻译后修饰能力,取决于使用的体系类型。常见的细菌裂解液体系通常不具备复杂的真核翻译后修饰(如糖基化),因此在需要特定糖型或复杂修饰的项目中,哺乳细胞表达仍然是更优选择。
不过,对于不依赖糖基化的蛋白功能验证、抗原制备、早期筛选等用途,无细胞表达依然能非常高效地满足“快速获得蛋白并完成实验”的需求。
无细胞表达能提供哪些交付形式和质控支持?
无细胞表达交付可以根据项目需求提供不同形式,例如反应液、粗纯样品或纯化后蛋白。质控方面可提供常规电泳结果、浓度检测、纯度评估等基础数据,若客户需要进一步功能验证,也可以配套提供结合测试、活性检测等扩展服务。
售前阶段我们通常会先了解客户的使用场景与目标要求,再推荐合适的交付规格与质控组合,确保客户拿到样品后能够直接进入关键实验,提升整体研发效率。
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