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MAC-T 牛乳腺上皮细胞

  • 中文名: MAC-T 牛乳腺上皮细胞
货号: IPDB-0151
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产品详情

名称:MAC-T 牛乳腺上皮细胞

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,传代具体步骤如下:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养


售后服务

 

重发标准


(1)细胞运输问题,如细胞丢失、瓶身破损、培养瓶严重漏液,冻存管内容物已融化;

(2)细胞污染问题,收到细胞7天内,发现细胞污染问题,经核实无误;

(3)细胞生长问题,收到细胞7天内,发现细胞不增殖,经核实无误。


不予重发


(1)收到细胞时间超过7天以上的;

(2)使用非我们推荐的细胞完培;

(3)细胞培养时经过其他处理导致细胞出现问题的;

(4)客户操作失误导致的细胞污染、细胞状态不好的;

(5)细胞冻存后再复苏的细胞;

(6)未能提供真实清晰细胞培养前3天的细胞状态照片。




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