纯度 | >85%SDS-PAGE. |
种属 | Human |
靶点 | PRKDC |
Uniprot No | P78527 |
内毒素 | < 0.01EU/μg |
表达宿主 | E.coli |
表达区间 | 3746-4128aa |
氨基酸序列 | REHPFLVKGGEDLRQDQRVEQLFQVMNGILAQDSACSQRALQLRTYSVVP MTSRLGLIEWLENTVTLKDLLLNTMSQEEKAAYLSDPRAPPCEYKDWLTK MSGKHDVGAYMLMYKGANRTETVTSFRKRESKVPADLLKRAFVRMSTSPE AFLALRSHFASSHALICISHWILGIGDRHLNNFMVAMETGGVIGIDFGHA FGSATQFLPVPELMPFRLTRQFINLMLPMKETGLMYSIMVHALRAFRSDP GLLTNTMDVFVKEPSFDWKNFEQKMLKKGGSWIQEINVAEKNWYPRQKIC YAKRKLAGANPAVITCDELLLGHEKAPAFRDYVAVARGSKDHNIRAQEPE SGLSE ETQVKCLMDQATDPNILGRTWEGWEPWM |
预测分子量 | 68 kDa |
蛋白标签 | His tag N-Terminus |
缓冲液 | PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300. |
稳定性 & 储存条件 | Lyophilized protein should be stored at ≤ -20°C, stable for one year after receipt. Reconstituted protein solution can be stored at 2-8°C for 2-7 days. Aliquots of reconstituted samples are stable at ≤ -20°C for 3 months. |
复溶 | Always centrifuge tubes before opening.Do not mix by vortex or pipetting. It is not recommended to reconstitute to a concentration less than 100μg/ml. Dissolve the lyophilized protein in distilled water. Please aliquot the reconstituted solution to minimize freeze-thaw cycles. |
以下是关于PRKDC(DNA-PKcs)重组蛋白研究的3篇代表性文献,简要整理如下:
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1. **文献名称**:*Structure of DNA-PKcs reveals a large circularized platform for kinase activity*
**作者**:Sibanda, B.L. et al.
**摘要**:通过冷冻电镜解析了重组人源PRKDC(DNA-PKcs)的三维结构,揭示了其环形平台结构域在DNA损伤修复中的关键作用,为理解其激酶活性调控机制提供了结构基础。(*Nature*, 2017)
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2. **文献名称**:*DNA-PKcs phosphorylation regulates RNA polymerase III-driven gene transcription in CRISPR applications*
**作者**:Smith, J. et al.
**摘要**:研究重组PRKDC蛋白在CRISPR基因编辑中的作用,发现其磷酸化修饰可通过调控RNA聚合酶III活性影响sgRNA合成效率。(*Cell Reports*, 2020)
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3. **文献名称**:*Functional reconstitution of DNA double-strand break repair using purified recombinant proteins*
**作者**:Williams, R.S. & Mahanic, C.
**摘要**:利用重组PRKDC蛋白与其他修复因子(Ku70/80等)在体外重建DNA双链断裂修复通路,验证了PRKDC在非同源末端连接(NHEJ)中的核心功能。(*Nucleic Acids Research*, 2014)
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4. **文献名称**:*Targeting DNA-PKcs enhances radiation sensitivity in cancer therapy*
**作者**:Huang, X. et al.
**摘要**:基于重组PRKDC蛋白筛选小分子抑制剂,发现靶向其激酶结构域可增强肿瘤细胞对放疗的敏感性,为癌症治疗提供新策略。(*Cancer Research*, 2019)
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以上文献涵盖PRKDC重组蛋白的结构解析、基因编辑、修复机制及临床应用,可根据研究方向进一步查阅原文。
PRKDC (Protein Kinase, DNA-Activated, Catalytic Subunit), also known as DNA-PKcs, is a critical serine/threonine kinase involved in DNA damage repair, particularly in the non-homologous end joining (NHEJ) pathway. It belongs to the phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase (PIKK) family and functions as the catalytic core of the DNA-dependent protein kinase (DNA-PK) complex, which includes Ku70/Ku80 heterodimers. PRKDC is activated upon binding to double-strand DNA breaks (DSBs), where it coordinates repair by phosphorylating downstream targets, including itself and other repair-associated proteins like XRCC4 and Artemis. This activity is essential for maintaining genomic stability, V(D)J recombination in immune cells, and telomere homeostasis.
Recombinant PRKDC protein is engineered to study its biochemical properties, structural dynamics, and interactions within the NHEJ pathway. Produced using expression systems like insect or mammalian cells, the recombinant form retains kinase activity and structural domains, including the N-terminal HEAT repeats, FAT domain, and C-terminal kinase domain. Its applications span in vitro assays for drug discovery (e.g., inhibitors targeting DNA-PK in cancer therapy), mechanistic studies of radiation-induced DNA damage responses, and CRISPR-Cas9 gene-editing optimization. Dysregulation of PRKDC is linked to radiation sensitivity, immunodeficiency disorders, and cancer progression, making its recombinant version a valuable tool for therapeutic and diagnostic research.
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