名称:
TRAMP-C1 小鼠前列腺癌细胞
一、 培养条件与操作
1、基础培养基:DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)培养基。
2、添加组分:
10% 胎牛血清(FBS);
必需添加物:ITS(胰岛素+转铁蛋白+硒)+ 10 nM 脱氢表雄酮 (培养基关键组分);
双抗:1% 青霉素-链霉素溶液。
3、培养环境
温度:37℃恒温;
气相:5% CO₂ + 95% 空气;
4、换液频率:每2–3天更换一次新鲜培养基。
二、传代操作
1、消化步骤:
弃旧培养基,PBS清洗细胞;
加入0.25% 胰蛋白酶(含EDTA),37℃消化1–2分钟至细胞变圆脱落。
2、终止与分瓶:
加入含血清培养基终止消化;
离心(1000 rpm, 5分钟)后重悬,按1:2–1:6比例接种新瓶。
冻存与复苏
3、冻存液配方:
方案A:90% FBS + 10% DMSO;
方案B:无血清专用冻存液。
冻存程序:梯度降温(→-80℃→液氮);
复苏要点:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后用完全培养基重悬。
售后服务
重发标准
(1)细胞运输问题,如细胞丢失、瓶身破损、培养瓶严重漏液,冻存管内容物已融化;
(2)细胞污染问题,收到细胞7天内,发现细胞污染问题,经核实无误;
(3)细胞生长问题,收到细胞7天内,发现细胞不增殖,经核实无误。
不予重发
(1)收到细胞时间超过7天以上的;
(2)使用非我们推荐的细胞完培;
(3)细胞培养时经过其他处理导致细胞出现问题的;
(4)客户操作失误导致的细胞污染、细胞状态不好的;
(5)细胞冻存后再复苏的细胞;
(6)未能提供真实清晰细胞培养前3天的细胞状态照片。
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