名称:3D4/21猪肺泡巨噬复苏细胞
细胞生长:贴壁
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞内空泡通常是细胞受到压力的表现,原因可能是培养基中缺乏谷氨酰胺、添加抗真菌剂、不适当的CO2环境对培养基中碳酸氢钠浓度或培养基的营养消耗殆尽。一般来说,对于某些细胞系,尤其是向3T3-L1这样具有脂滴的细胞,细胞包含空泡是正常的。缺氧:当缺氧时 细胞na泵动力不足导致细胞内水储留,Na泵动力不足导致其不能向细胞外运送足量的Na,从而使细胞内处于GAO渗透压状态,更多胞外水分子进入胞内,造成水储留。可以理解为因为水分的流失,细胞内出现细胞质的浓缩,从而出现空泡。原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况,是有些细胞处于终末分化状态,不会再分裂,时间长了就会空泡化而死亡。传代细胞出现这种状况比较少见,可能的原因是细胞代龄较长,老化严重。传代次数太多,细胞老化会出现上述的情况,但是还不排除其他因素,胞质中出现颗粒、脂滴或空泡也可能是细胞代谢不良的反应。我前一段时间养成纤维细胞(原代)的时候也出现过类似的情况。可以将血清的浓度提GAO10%到15%到20%;血清的质量,可以借用些质量HAO的血清试试,看细胞状态是否会改变;把细胞消化收集起来,然后离心后重悬,重新种植。培养基里添加谷氨酰氨;细胞代谢障碍的问题,传代的次数可能不是关键因素,应该可以调整得过来;PH值不对,就用PH值试纸测了一下,大概6.7左右,加碳酸氢钠调到7.2左右,过了一段就HAO了。
重发标准
(1)细胞运输问题,如细胞丢失、瓶身破损、培养瓶严重漏液,冻存管内容物已融化;
(2)细胞污染问题,收到细胞7天内,发现细胞污染问题,经核实无误;
(3)细胞生长问题,收到细胞7天内,发现细胞不增殖,经核实无误。
不予重发
(1)收到细胞时间超过7天以上的;
(2)使用非我们推荐的细胞完培;
(3)细胞培养时经过其他处理导致细胞出现问题的;
(4)客户操作失误导致的细胞污染、细胞状态不好的;
(5)细胞冻存后再复苏的细胞;
(6)未能提供真实清晰细胞培养前3天的细胞状态照片。
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