纯度 | >90%SDS-PAGE. |
种属 | E.coli |
靶点 | PKBa |
Uniprot No | P54644 |
内毒素 | < 0.01EU/μg |
表达宿主 | E.coli |
表达区间 | 1-444aa |
氨基酸序列 | MSTAPIKHEG FLTKEGGGFK SWKKRWFILK GGDLSYYKTK GELVPLGVIH LNTSGHIKNS DRKKRVNGFE VQTPSRTYFL CSETEEERAK WIEILINERE LLLNGGKQPK KSEKVGVADF ELLNLVGKGS FGKVIQVRKK DTGEVYAMKV LSKKHIVEHN EVEHTLSERN ILQKINHPFL VNLNYSFQTE DKLYFILDYV NGGELFYHLQ KDKKFTEDRV RYYGAEIVLA LEHLHLSGVI YRDLKPENLL LTNEGHICMT DFGLCKEGLL TPTDKTGTFC GTPEYLAPEV LQGNGYGKQV DWWSFGSLLY EMLTGLPPFY NQDVQEMYRK IMMEKLSFPH FISPDARSLL EQLLERDPEK RLADPNLIKR HPFFRSIDWE QLFQKNIPPP FIPNVKGSAD TSQIDPVFTD EAPSLTMAGE CALNPQQQKD FEGFTYVAES EHLR |
预测分子量 | 51 kDa |
蛋白标签 | His tag N-Terminus |
缓冲液 | PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300. |
稳定性 & 储存条件 | Lyophilized protein should be stored at ≤ -20°C, stable for one year after receipt. Reconstituted protein solution can be stored at 2-8°C for 2-7 days. Aliquots of reconstituted samples are stable at ≤ -20°C for 3 months. |
复溶 | Always centrifuge tubes before opening.Do not mix by vortex or pipetting. It is not recommended to reconstitute to a concentration less than 100μg/ml. Dissolve the lyophilized protein in distilled water. Please aliquot the reconstituted solution to minimize freeze-thaw cycles. |
以下是与PKBα(AKT1)重组蛋白相关的3篇代表性文献摘要概述:
1. **文献名称**:*"Characterization of a 3-phosphoinositide-dependent protein kinase which phosphorylates and activates protein kinase Bα"*
**作者**:Alessi, D.R. et al.
**摘要**:该研究首次报道了PDK1对重组人PKBα的磷酸化激活机制,通过体外实验证实3-磷酸肌醇依赖性激酶PDK1在Thr308位点磷酸化PKBα,揭示其信号通路调控的关键步骤。
2. **文献名称**:*"Expression and purification of functional recombinant human protein kinase Bα (Akt1) in Escherichia coli"*
**作者**:Yang, J. et al.
**摘要**:描述在大肠杆菌系统中高效表达可溶性重组人PKBα的方法,通过亲和层析纯化获得具有激酶活性的蛋白,为后续体外功能研究提供可靠工具。
3. **文献名称**:*"Structural insights into the autoinhibition mechanism of PH domain-containing kinases: The case of PKBα/Akt1"*
**作者**:Calleja, V. et al.
**摘要**:利用重组PKBα蛋白的晶体结构分析,揭示其PH结构域与激酶结构域的自抑制相互作用机制,为靶向PKBα的药物设计提供结构基础。
以上文献涵盖PKBα的激活机制、重组表达技术及结构功能解析,均为该领域经典研究。实际引用时建议通过PubMed或学术数据库核对完整信息。
PKBa, also known as protein kinase B alpha (Akt1), is a serine/threonine kinase central to the PI3K-Akt signaling pathway, which regulates critical cellular processes including survival, proliferation, metabolism, and apoptosis. As a key effector of insulin and growth factor signaling, PKBa phosphorylates downstream targets like mTOR, GSK-3β, and FOXO transcription factors, influencing cell cycle progression and stress responses. Dysregulation of PKBa is implicated in cancers, diabetes, and neurodegenerative diseases, making it a prominent therapeutic target.
Recombinant PKBa protein is produced using genetic engineering techniques, typically through heterologous expression in bacterial (e.g., *E. coli*) or mammalian systems (e.g., HEK293 cells). The protein is often tagged with affinity markers (e.g., GST, His-tag) to facilitate purification via chromatography. Post-translational modifications, such as phosphorylation at Thr308 and Ser473 residues required for full activation, may be preserved in mammalian expression systems, enhancing functional relevance.
Researchers utilize recombinant PKBa to study its enzymatic activity, substrate interactions, and regulatory mechanisms in vitro. It serves as a critical tool for high-throughput drug screening to identify inhibitors or activators for therapeutic development. Additionally, it aids in structural studies (e.g., X-ray crystallography) to map binding sites and design targeted molecules. Commercial availability of active, purified PKBa has accelerated research into pathway dysregulation in diseases and the validation of biomarkers. Its role in resistance to chemotherapy and targeted therapies further underscores its importance in translational oncology.
在生物科技领域,蛋白研发与生产是前沿探索的关键支撑。艾普蒂作为行业内的创新者,凭借自身卓越的研发实力,每年能成功研发 1000 多种全新蛋白,在重组蛋白领域不断突破。 在重组蛋白生产过程中,艾普蒂积累了丰富且成熟的经验。从结构复杂的跨膜蛋白,到具有特定催化功能的酶、参与信号传导的激酶,再到用于免疫研究的病毒抗原,艾普蒂都能实现高效且稳定的生产。 这一成就离不开艾普蒂强大的技术平台。我们构建了多元化的重组蛋白表达系统,昆虫细胞、哺乳动物细胞以及原核蛋白表达系统协同运作。不同的表达系统各有优势,能够满足不同客户对重组蛋白的活性、产量、成本等多样化的需求,从而提供高品质、低成本的活性重组蛋白。 艾普蒂提供的不只是产品,更是从源头到终端的一站式解决方案。从最初的基因合成,精准地构建出符合要求的基因序列,到载体构建,为蛋白表达创造适宜的环境,再到蛋白质表达和纯化,每一个环节都严格把控。我们充分尊重客户的个性化需求,在表达 / 纯化标签的选择、表达宿主的确定等方面,为客户量身定制专属方案。 同时,艾普蒂还配备了多种纯化体系,能够应对不同特性蛋白的纯化需求。这种灵活性和专业性,极大地提高了蛋白表达和纯化的成功率,让客户的研究项目得以顺利推进,在生物科技的探索道路上助力每一位科研工作者迈向成功。
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艾普蒂生物在重组蛋白和天然蛋白开发领域经验十分丰富,拥有超过 2 万种重组蛋白的开发案例。在四大重组蛋白表达平台的运用上,艾普蒂生物不仅经验老到,还积累了详实的成功案例。针对客户的工业化生产需求,我们能够定制并优化实验方案。通过小试探索、工艺放大以及条件优化等环节,对重组蛋白基因序列进行优化,全面探索多种条件,精准找出最契合客户需求的生产方法。 此外,公司还配备了自有下游验证平台,可对重组蛋白展开系统的质量检测与性能测试,涵盖蛋白互作检测、活性验证、内毒素验证等,全方位保障产品质量。 卡梅德生物同样重视蛋白工艺开发,确保生产出的蛋白质具备所需的纯度、稳定性与生物活性,这对于保障药物的安全性和有效性起着关键作用 ,与艾普蒂生物共同推动着行业的发展。
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