艾普蒂多次跨膜蛋白开发服务:攻克膜蛋白研究与产业化的技术高地
一、技术突破:解决跨膜蛋白开发的四大核心挑战
针对GPCR、离子通道等多次跨膜蛋白的结构复杂性,艾普蒂开发出MEMPro™技术平台,系统性解决表达、纯化、稳定化等关键难题,项目成功率提升至行业领先的75%以上。
1. 高效表达系统
● 宿主优化:改造哺乳动物细胞(CHO/HEK293)膜结构,跨膜蛋白表达量达0.5-2 mg/L,较传统方法提升5-8倍
● 定向脂质体包裹技术:模拟天然膜环境,维持7次跨膜蛋白正确折叠构象,活性验证通过率>90%
2. 稳定构象保持
● 添加专属分子伴侣组合(含12种辅助因子),抑制蛋白聚集
● 二硫键正确形成率>95%,α螺旋结构占比达85%
3. 温和纯化工艺
● 非离子型去垢剂筛选体系(覆盖30种去垢剂组合)
● 亲和层析联合分子筛纯化,目标蛋白回收率>60%
4. 功能活性验证
● 建立膜片钳、表面等离子共振(SPR)、荧光钙流检测三位一体验证平台
● 配体结合活性检测灵敏度达nM级
二、服务流程:从基因到活性验证的完整解决方案
艾普蒂建立标准化开发路径,平均交付周期缩短至8-12周:
阶段1:需求分析与方案设计(1-2周)
• 免费跨膜结构域生物信息学分析(拓扑结构预测、疏水性图谱绘制)
• 定制表达系统选择:哺乳动物/昆虫细胞/脂质体重组体系
阶段2:基因构建与优化(2-3周)
• 密码子优化覆盖10种表达宿主偏好性
• 信号肽库筛选(提升膜定位效率至85%)
阶段3:表达与膜定位(3-4周)
• 低剪切力转染技术,细胞存活率>90%
• 荧光标记定位验证(如GFP-融合表达)
阶段4:纯化与复性(2-3周)
• 纳米盘组装技术维持跨膜结构稳定
• 去垢剂置换工艺(CMC值精准控制)
阶段5:功能验证与交付(1-2周)
• 基础检测:SDS-PAGE、Western Blot、CD光谱分析
• 高级检测:配体结合活性、离子通道通透性验证
三、应用领域:赋能跨膜蛋白相关研究与产业转化
覆盖基础研究到药物开发的完整价值链
1. 药物靶点研究
● GPCR药物开发:已成功表达5类GPCR家族(包括A类、B类、C类)
● 案例:某镇痛药靶点μ型阿片受体开发,获得>80%配体抑制活性
2. 抗体药物开发
● 膜蛋白抗体生成:抗原制备周期缩短至4周
● 案例:某肿瘤靶向治疗用抗HER2单抗,表位识别准确率提升3倍
3. 结构生物学研究
● 冷冻电镜样品制备:蛋白纯度>95%,粒径均一性达90%
● 案例:协助解析某电压门控钠通道3.2Å分辨率结构
4. 诊断试剂开发
● 跨膜蛋白抗原开发:批间一致性CV值<5%
● 案例:某自免疫疾病检测试剂盒,灵敏度提升至0.1 IU/mL
5. 工业酶开发
● 膜结合酶改造:成功开发耐高温脂肪酶(70℃活性保持率>80%)
● 案例:某生物燃料用酶催化效率提升40%
四、成功案例:全球客户的共同选择
验证技术实力的标志性项目
学术合作案例
● • 某大学神经科学研究所挑战:表达含4个跨膜结构域的星形胶质细胞通道蛋白
● 解决方案:采用脂质体重组表达体系
● 成果:获得足量活性蛋白,研究成果发表于《Cell》子刊
药企合作案例
● • 某跨国药企代谢性疾病药物开发挑战:G蛋白偶联胆汁酸受体(GPBAR1)表达量不足0.1 mg/L
● 解决方案:应用定向脂质体包裹技术
● 成果:表达量提升至1.2 mg/L,推动先导化合物筛选提前6个月
诊断企业案例
● • 国内领先IVD企业呼吸道病原检测项目需求:同步开发7种病毒跨膜蛋白抗原
● 成果:4个月内完成所有抗原制备
五、质量保障:全流程管控体系与客户承诺
艾普蒂建立三级质量体系,确保数据可靠性与结果重现性:
原料控制
● 细胞库通过STR鉴定与支原体检测(每季度复检)
● 关键试剂经USP标准验证
过程质控
● 阶段里程碑检测:包括膜定位效率、去垢剂筛选报告等
● 实时电子实验记录系统(ELN),确保数据完整可追溯
交付标准
● 基础级:纯度>80%(SDS-PAGE),提供拓扑结构验证
● 研究级:纯度>90%,包含CD光谱与基础活性数据
● 药物开发级:符合ICH指南,提供CMC技术文件
客户权益保障
● 保密协议:执行NDA标准,数据加密存储
● 技术转移支持:提供标准化SOP与现场培训
● 售后跟踪:提供3个月技术咨询
为什么选择艾普蒂?
● 累计完成300+次跨膜蛋白开发项目
● 服务全球10个国家科研机构与药企
● 交付周期较行业平均缩短30%
● 技术团队平均行业经验12年
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● 优先排期权益
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