多次跨膜蛋白开发

多次跨膜蛋白开发

艾普蒂多次跨膜蛋白开发服务:攻克膜蛋白研究与产业化的技术高地

一、技术突破:解决跨膜蛋白开发的四大核心挑战

针对GPCR、离子通道等多次跨膜蛋白的结构复杂性,艾普蒂开发出MEMPro™技术平台,系统性解决表达、纯化、稳定化等关键难题,项目成功率提升至行业领先的75%以上。

1. 高效表达系统

 宿主优化‌:改造哺乳动物细胞(CHO/HEK293)膜结构,跨膜蛋白表达量达0.5-2 mg/L,较传统方法提升5-8倍

 定向脂质体包裹技术‌:模拟天然膜环境,维持7次跨膜蛋白正确折叠构象,活性验证通过率>90%

2. 稳定构象保持

 添加专属分子伴侣组合(含12种辅助因子),抑制蛋白聚集

 二硫键正确形成率>95%,α螺旋结构占比达85%

3. 温和纯化工艺

 非离子型去垢剂筛选体系(覆盖30种去垢剂组合)

 亲和层析联合分子筛纯化,目标蛋白回收率>60%

4. 功能活性验证

 建立膜片钳、表面等离子共振(SPR)、荧光钙流检测三位一体验证平台

 配体结合活性检测灵敏度达nM级

 

二、服务流程:从基因到活性验证的完整解决方案

艾普蒂建立标准化开发路径,平均交付周期缩短至8-12周:

阶段1:需求分析与方案设计(1-2周)

• 免费跨膜结构域生物信息学分析(拓扑结构预测、疏水性图谱绘制)

• 定制表达系统选择:哺乳动物/昆虫细胞/脂质体重组体系

阶段2:基因构建与优化(2-3周)

• 密码子优化覆盖10种表达宿主偏好性

• 信号肽库筛选(提升膜定位效率至85%)

阶段3:表达与膜定位(3-4周)

• 低剪切力转染技术,细胞存活率>90%

• 荧光标记定位验证(如GFP-融合表达)

阶段4:纯化与复性(2-3周)

• 纳米盘组装技术维持跨膜结构稳定

• 去垢剂置换工艺(CMC值精准控制)

阶段5:功能验证与交付(1-2周)

• 基础检测:SDS-PAGE、Western Blot、CD光谱分析

• 高级检测:配体结合活性、离子通道通透性验证

三、应用领域:赋能跨膜蛋白相关研究与产业转化

覆盖基础研究到药物开发的完整价值链

1. 药物靶点研究

 GPCR药物开发:已成功表达5类GPCR家族(包括A类、B类、C类)

 案例:某镇痛药靶点μ型阿片受体开发,获得>80%配体抑制活性

2. 抗体药物开发

 膜蛋白抗体生成:抗原制备周期缩短至4周

 案例:某肿瘤靶向治疗用抗HER2单抗,表位识别准确率提升3倍

3. 结构生物学研究

 冷冻电镜样品制备:蛋白纯度>95%,粒径均一性达90%

 案例:协助解析某电压门控钠通道3.2Å分辨率结构

4. 诊断试剂开发

 跨膜蛋白抗原开发:批间一致性CV值<5%

 案例:某自免疫疾病检测试剂盒,灵敏度提升至0.1 IU/mL

5. 工业酶开发

 膜结合酶改造:成功开发耐高温脂肪酶(70℃活性保持率>80%)

 案例:某生物燃料用酶催化效率提升40%

 

四、成功案例:全球客户的共同选择

验证技术实力的标志性项目

学术合作案例

 大学神经科学研究所挑战:表达含4个跨膜结构域的星形胶质细胞通道蛋白

 解决方案:采用脂质体重组表达体系

 成果:获得足量活性蛋白,研究成果发表于《Cell》子刊

药企合作案例

 • 某跨国药企代谢性疾病药物开发挑战:G蛋白偶联胆汁酸受体(GPBAR1)表达量不足0.1 mg/L

 解决方案:应用定向脂质体包裹技术

 成果:表达量提升至1.2 mg/L,推动先导化合物筛选提前6个月

诊断企业案例

 • 国内领先IVD企业呼吸道病原检测项目需求:同步开发7种病毒跨膜蛋白抗原

 成果:4个月内完成所有抗原制备

 

五、质量保障:全流程管控体系与客户承诺

艾普蒂建立三级质量体系,确保数据可靠性与结果重现性:

原料控制

 细胞库通过STR鉴定与支原体检测(每季度复检)

 关键试剂经USP标准验证

过程质控

 阶段里程碑检测:包括膜定位效率、去垢剂筛选报告等

 实时电子实验记录系统(ELN),确保数据完整可追溯

交付标准

 基础级:纯度>80%(SDS-PAGE),提供拓扑结构验证

 研究级:纯度>90%,包含CD光谱与基础活性数据

 药物开发级:符合ICH指南,提供CMC技术文件

客户权益保障

 保密协议:执行NDA标准,数据加密存储

 技术转移支持:提供标准化SOP与现场培训

 售后跟踪:提供3个月技术咨询

 

为什么选择艾普蒂?

 累计完成300+次跨膜蛋白开发项目

 服务全球10个国家科研机构与药企

 交付周期较行业平均缩短30%

 技术团队平均行业经验12年

立即咨询

 提交蛋白序列信息,72小时内获取定制开发方案。首单客户可享:免费跨膜结构域分析

 优先排期权益

 专属项目经理全程跟进