名称 : TPC-1人乳头状甲状腺癌细胞
细胞简称 : TPC -1
细胞形态 : 上皮细胞样
生长特性 : 贴壁细胞
培养环境 : 空气,95% ;CO2,5%
冻存条件 : 55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO 液氮
完全培养基 : RPMI-1640(PM150110)+10%FBS(164210-50)+1%P/S(PB180120)
传代步骤 :
1、吸出原培养液。
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),轻轻晃动培养瓶
使之浸润所有细胞。
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶。
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。
6、收集细胞悬液离心,1200rpm /min 3分钟,离心完吸出上清丢弃。
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
消化时间 : 3~ 5分钟
传代比例(密度) : 1:3-1:6
换液频次 : 2~ 3次/周
重发标准
(1)细胞运输问题,如细胞丢失、瓶身破损、培养瓶严重漏液,冻存管内容物已融化;
(2)细胞污染问题,收到细胞7天内,发现细胞污染问题,经核实无误;
(3)细胞生长问题,收到细胞7天内,发现细胞不增殖,经核实无误。
不予重发
(1)收到细胞时间超过7天以上的;
(2)使用非我们推荐的细胞完培;
(3)细胞培养时经过其他处理导致细胞出现问题的;
(4)客户操作失误导致的细胞污染、细胞状态不好的;
(5)细胞冻存后再复苏的细胞;
(6)未能提供真实清晰细胞培养前3天的细胞状态照片。
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