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NUGC-4 人胃癌细胞

  • 中文名: NUGC-4 人胃癌细胞
货号: IPDB-0014
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产品详情

一、产品信息
 

细胞名称

NUGC-4 人胃癌细胞

产品货号

IPDB-0014

种属来源

组织来源

生长特性

贴壁生长

细胞形态

见图1

细胞完培

1640+10%FBS+1%P/S

培养环境

37℃,5%CO2,饱和湿度

特别说明

仅供科学研究使用,请在生物安全柜中操作,并做好个人防护


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二、细胞培养操作

1、T25瓶形式
(1)收到T25瓶细胞货物后,打开外包装,取出T25瓶细胞;
(2)使用75%酒精对T25瓶外表面进行喷雾消毒处理,擦拭干净后,放置细胞培养箱,静置2小时以上;
(3)取出T25瓶,在倒置显微镜下观察细胞状态,并拍照记录,100倍,1张清晰照片即可;
(4)若细胞正常贴壁且细胞密度低于80%时,在生物安全柜中,进行细胞换液处理,即将T25瓶中培养上清全部丢弃,加入5mL细胞完培,然后放置细胞培养箱中培养;
(5)若细胞正常贴壁且细胞密度高于80%时,在生物安全柜中,进行细胞传代处理,详见“细胞传代”操作,将传代后的2个T25瓶放置细胞培养箱中培养;
(6)若细胞出现漂浮,在生物安全柜中,请将T25瓶中漂浮的细胞及瓶底细胞全部收集到50mL离心管中,离心收集细胞沉淀,加入1mL胰酶溶液消化细胞沉淀,再加入2mL细胞完培终止消化,离心收集细胞后,加入1mL细胞完培重悬,将细胞悬液重新接种到T25瓶中。
2、 冻存管形式
(1)收到冻存管货物后,打开外包装,取出细胞冻存管,如暂时不用,请立即放置-80℃冰箱或液氮罐中暂存,建议暂存时间不要超过3天;
(2)取出细胞冻存管,立即进行细胞复苏,详见“细胞复苏”操作,1支冻存管建议接种到1个T25瓶中,另1支细胞冻存管备用。

 

三、质量控制
 

细菌检测

培养法,阴性

真菌检测

培养法,阴性

支原体检测

PCR法,阴性

STR鉴定

细胞STR鉴定报告


四、细胞培养

1、细胞复苏
(1)提前15分钟打开水浴锅设备,设置温度为37℃;
(2)从-80℃冰箱或液氮罐中取出1支细胞冻存管;
(3)将冻存管立即放置在水浴中,不断摇晃冻存管,使其在2分钟内解冻;
(4)在生物安全柜中,将冻存管中细胞悬液转移到15mL离心管中,加入4mL细胞完培;
(5)配平,室温离心,1000rpm离心5分钟;
(6)在生物安全柜中,弃去上清液,加入1mL细胞完培重悬细胞沉淀,将细胞悬液全部转移到T25瓶中,补加4mL细胞完培;
(7)将T25瓶放置细胞培养箱中培养;
(8)第二天在倒置显微镜下观察细胞状态,并更换新鲜细胞完培。
2、细胞传代
(1)当T25瓶细胞密度达到80%以上时,在生物安全柜中,弃去培养上清;
(2)加入2mL PBS润洗细胞,弃去PBS;
(3)加入2mL胰酶溶液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)浸润细胞,放置细胞培养箱处理1~3分钟,待细胞从瓶皿完全脱落后,加入3mL细胞完培终止消化,将细胞悬液转移到15mL离心管中;
(4)配平,室温离心,1000rpm离心5分钟;
(5)在生物安全柜中,弃去上清液,加入1mL细胞完培重悬细胞沉淀,将细胞悬液平均分装到2个新的T25瓶中,每个T25瓶分别补加4mL细胞完培,混合均匀;
(7)将T25瓶放置细胞培养箱中培养。
3、细胞冻存
(1)当T25瓶细胞密度达到80%以上时,在生物安全柜中,弃去培养上清;
(2)加入2mL PBS润洗细胞,弃去PBS;
(3)加入2mL胰酶溶液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)浸润细胞,放置细胞培养箱处理1~3分钟,待细胞从瓶皿完全脱落后,加入3mL细胞完培终止消化,吹打均匀后,取50uL细胞悬液进行计数,剩余细胞悬液转移到15mL离心管中;
(4)配平,室温离心,1000rpm离心5分钟;
(5)在生物安全柜中,弃去上清液,根据细胞数量加入适量细胞冻存液重悬细胞沉淀,细胞冻存密度为1×10E6~5×10E6/mL,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,在冻存管壁做好标识;
(6)将冻存管放入-80℃冰箱,24小时后转入液氮罐中长期储存。
 

五、售后服务
 

重发标准

(1)细胞运输问题,如细胞丢失、瓶身破损、培养瓶严重漏液,冻存管内容物已融化;
(2)细胞污染问题,收到细胞7天内,发现细胞污染问题,经核实无误;
(3)细胞生长问题,收到细胞7天内,发现细胞不增殖,经核实无误。

不予重发

(1)收到细胞时间超过7天以上的;
(2)使用非我们推荐的细胞完培;
(3)细胞培养时经过其他处理导致细胞出现问题的;
(4)客户操作失误导致的细胞污染、细胞状态不好的;
(5)细胞冻存后再复苏的细胞;
(6)未能提供真实清晰细胞培养前3天的细胞状态照片。


客户数据及评论

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