产品名称：
SK-HEP-1人肝癌细胞
一、基础培养准备
培养基：采用 MEM 培养基，添加 10% 热灭活胎牛血清、1% 青霉素 - 链霉素，4℃避光保存，2 周内使用。
环境：37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，定期校准参数。
二、细胞复苏
冻存管从液氮取出后，37℃水浴 1-2 分钟融化，75% 酒精消毒外壁。
细胞悬液移入含 5mL 培养基的离心管，1000rpm 离心 5 分钟，弃上清。
用 2mL 培养基重悬，接种至 T25 培养瓶，补加培养基至 5mL，24 小时后换液。
细胞融合度达 70%-80% 时，弃旧培养基，PBS 冲洗 2 次。
加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化 2-3 分钟，镜见细胞变圆后加 2mL 培养基终止。
吹打细胞成悬液，1000rpm 离心 5 分钟，按 1:3-1:5 比例接种新瓶，3-4 天传代一次。
冻存液为 90% FBS+10% DMSO，冰上预冷。
消化离心后的细胞用冻存液重悬，密度 1-5×10⁶cells/mL，分装冻存管。
程序降温：4℃30 分钟→-20℃2 小时→-80℃过夜→液氮保存。
严格无菌操作，避免交叉污染，定期消毒培养环境。
正常细胞呈上皮样，若出现形态异常、漂浮增多，及时排查处理。
每 2-3 天换液，观察培养基颜色变化，确保 pH 稳定。
售后服务
重发标准
(1）细胞运输问题，如细胞丢失、瓶身破损、培养瓶严重漏液，冻存管内容物已融化；
(2）细胞污染问题，收到细胞7天内，发现细胞污染问题，经核实无误；
(3）细胞生长问题，收到细胞7天内，发现细胞不增殖，经核实无误。
不予重发
(1）收到细胞时间超过7天以上的；
(2）使用非我们推荐的细胞完培；
(3）细胞培养时经过其他处理导致细胞出现问题的；
(4）客户操作失误导致的细胞污染、细胞状态不好的；
(5）细胞冻存后再复苏的细胞；
(6）未能提供真实清晰细胞培养前3天的细胞状态照片。
×
