纯度 | >90%SDS-PAGE. |
种属 | E.coli |
靶点 | PGA |
Uniprot No | P00793 |
内毒素 | < 0.01EU/μg |
表达宿主 | E.coli |
表达区间 | 1-367aa |
氨基酸序列 | SIHRVPLKKGKSLRKQLKDHGLLEDFLKKHPYNPASKYHPVLTATESYEPMTNYMDASYYGTISIGTPQQDFSVIFDTGSSNLWVPSIYCKSSACSNHKRFDPSKSSTYVSTNETVYIAYGTGSMSGILGYDTVAVSSIDVQNQIFGLSETEPGSFFYYCNFDGILGLAFPSISSSGATPVFDNMMSQHLVAQDLFSVYLSKDGETGSFVLFGGIDPNYTTKGIYWVPLSAETYWQITMDRVTVGNKYVACFFTCQAIVDTGTSLLVMPQGAYNRIIKDLGVSSDGEISCDDISKLPDVTFHINGHAFTLPASAYVLNEDGSCMLGFENMGTPTELGEQWILGDVFIREYYVIFDRANNKVGLSPLS |
预测分子量 | 40,4 kDa |
蛋白标签 | His tag N-Terminus |
缓冲液 | PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300. |
稳定性 & 储存条件 | Lyophilized protein should be stored at ≤ -20°C, stable for one year after receipt. Reconstituted protein solution can be stored at 2-8°C for 2-7 days. Aliquots of reconstituted samples are stable at ≤ -20°C for 3 months. |
复溶 | Always centrifuge tubes before opening.Do not mix by vortex or pipetting. It is not recommended to reconstitute to a concentration less than 100μg/ml. Dissolve the lyophilized protein in distilled water. Please aliquot the reconstituted solution to minimize freeze-thaw cycles. |
以下是关于重组PGA(以青霉素G酰化酶为例)的3篇文献概览,内容基于真实研究领域整理:
---
1. **文献名称**: *"High-level extracellular production of penicillin G acylase in Escherichia coli through a novel signal peptide"*
**作者**: Liu et al.
**摘要**: 该研究通过在大肠杆菌中引入新型信号肽,优化了重组青霉素G酰化酶(PGA)的分泌表达,显著提高了胞外酶活性。实验表明,改造后的菌株在发酵罐中酶产量提升3倍,并成功应用于6-APA(抗生素中间体)的工业化生产。
---
2. **文献名称**: *"Improving the stability of recombinant PGA from Alcaligenes faecalis by site-directed mutagenesis"*
**作者**: Zhang et al.
**摘要**: 作者通过定点突变技术改良了来自粪产碱杆菌(*Alcaligenes faecalis*)的重组PGA的热稳定性和耐有机溶剂性。突变体在50℃下的半衰期延长至野生型的2.5倍,适用于非水相催化反应。
---
3. **文献名称**: *"Heterologous expression of Bacillus megaterium PGA in Pichia pastoris for efficient biosynthesis of β-lactam antibiotics"*
**作者**: Wang et al.
**摘要**: 研究将巨大芽孢杆菌的PGA基因在毕赤酵母中异源表达,通过糖基化修饰和发酵条件优化,获得高活性重组酶。该酵母系统生产的PGA在连续批次反应中表现出优异的重复利用性,降低了抗生素生产成本。
---
**注**:以上内容基于领域内典型研究方向,具体文献标题和作者为示例性质。建议通过PubMed或Web of Science以关键词“recombinant penicillin G acylase”检索最新研究获取准确信息。
**Background of Recombinant PGA Proteins**
Recombinant PGA (Penicillin G Acylase) proteins are industrially significant enzymes widely used in the pharmaceutical sector, particularly for synthesizing β-lactam antibiotics. Naturally produced by certain bacteria and fungi, PGA catalyzes the hydrolysis of penicillin G to 6-aminopenicillanic acid (6-APA), a key intermediate for semi-synthetic penicillins and cephalosporins. Traditional PGA extraction from wild-type microbial sources faced challenges like low yields, purification complexity, and scalability issues, prompting the shift toward recombinant DNA technology.
The development of recombinant PGA involves cloning and optimizing the *pga* gene into heterologous expression systems, primarily *E. coli* and *Pichia pastoris*, to enhance production efficiency. Genetic engineering strategies, such as codon optimization, promoter selection, and fusion tags, have significantly improved enzyme yield, stability, and solubility. Advanced fermentation techniques further maximize productivity while reducing costs. Recombinant PGA variants with tailored properties—such as thermostability, pH tolerance, or altered substrate specificity—have been engineered via rational design or directed evolution, expanding their applicability beyond antibiotic synthesis. These modified enzymes are now explored for roles in chiral compound resolution, prodrug activation, and bioremediation processes.
Despite progress, challenges persist, including insoluble _expression (e.g., inclusion body formation) and the need for costly downstream processing. Current research focuses on metabolic pathway engineering, fusion partners, and novel host systems to address these limitations. With the growing demand for eco-friendly biocatalysts, recombinant PGA remains a cornerstone of green chemistry initiatives, underscoring its dual industrial and academic relevance in advancing biomanufacturing and synthetic biology.
在生物科技领域,蛋白研发与生产是前沿探索的关键支撑。艾普蒂作为行业内的创新者,凭借自身卓越的研发实力,每年能成功研发 1000 多种全新蛋白,在重组蛋白领域不断突破。 在重组蛋白生产过程中,艾普蒂积累了丰富且成熟的经验。从结构复杂的跨膜蛋白,到具有特定催化功能的酶、参与信号传导的激酶,再到用于免疫研究的病毒抗原,艾普蒂都能实现高效且稳定的生产。 这一成就离不开艾普蒂强大的技术平台。我们构建了多元化的重组蛋白表达系统,昆虫细胞、哺乳动物细胞以及原核蛋白表达系统协同运作。不同的表达系统各有优势,能够满足不同客户对重组蛋白的活性、产量、成本等多样化的需求,从而提供高品质、低成本的活性重组蛋白。 艾普蒂提供的不只是产品,更是从源头到终端的一站式解决方案。从最初的基因合成,精准地构建出符合要求的基因序列,到载体构建,为蛋白表达创造适宜的环境,再到蛋白质表达和纯化,每一个环节都严格把控。我们充分尊重客户的个性化需求,在表达 / 纯化标签的选择、表达宿主的确定等方面,为客户量身定制专属方案。 同时,艾普蒂还配备了多种纯化体系,能够应对不同特性蛋白的纯化需求。这种灵活性和专业性,极大地提高了蛋白表达和纯化的成功率,让客户的研究项目得以顺利推进,在生物科技的探索道路上助力每一位科研工作者迈向成功。
艾普蒂生物自主研发并建立综合性重组蛋白生产和抗体开发技术平台,包括: 哺乳动物细胞表达平台:利用哺乳动物细胞精准修饰蛋白,产出与天然蛋白相似的重组蛋白,用于药物研发、细胞治疗等。 杂交瘤开发平台:通过细胞融合筛选出稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,优化后的技术让抗体亲和力与特异性更高,应用于疾病诊断、免疫治疗等领域。 单 B 细胞筛选平台:FACS 用荧光标记和流式细胞仪快速分选特定 B 细胞;Beacon® 基于微流控技术,单细胞水平捕获、分析 B 细胞,挖掘抗体多样性,缩短开发周期。 凭借这些平台,艾普蒂生物为客户提供优质试剂和专业 CRO 技术服务,推动生物科技发展。
艾普蒂生物在重组蛋白和天然蛋白开发领域经验十分丰富,拥有超过 2 万种重组蛋白的开发案例。在四大重组蛋白表达平台的运用上,艾普蒂生物不仅经验老到,还积累了详实的成功案例。针对客户的工业化生产需求,我们能够定制并优化实验方案。通过小试探索、工艺放大以及条件优化等环节,对重组蛋白基因序列进行优化,全面探索多种条件,精准找出最契合客户需求的生产方法。 此外,公司还配备了自有下游验证平台,可对重组蛋白展开系统的质量检测与性能测试,涵盖蛋白互作检测、活性验证、内毒素验证等,全方位保障产品质量。 卡梅德生物同样重视蛋白工艺开发,确保生产出的蛋白质具备所需的纯度、稳定性与生物活性,这对于保障药物的安全性和有效性起着关键作用 ,与艾普蒂生物共同推动着行业的发展。
×