免疫荧光三标
产品价格： 150.00
产品规格： 张
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品牌名称： 艾普蒂生物
免疫荧光三标检测 (Immunofluorescence Triple Labeling)
免疫荧光三标技术通过三种特异性荧光标记抗体，在单张样本上实现三种靶抗原的同步可视化与空间关系解析。结合DAPI核染色，可在亚细胞水平精准定位三种目标蛋白的分布、共表达及相互作用，为复杂调控机制研究提供关键证据。
三标技术核心挑战与突破
标准化三标流程（分轮次避光操作）
预准备
脱蜡复水 → 热诱导抗原修复 → 10%正常血清封闭
第一染色轮（靶抗原A）
一抗A（兔源）4℃孵育过夜
Alexa Fluor® 488二抗（绿色）37℃避光孵育1h
第二染色轮（靶抗原B）
3. 一抗B（鼠源）4℃孵育过夜
4. Alexa Fluor® 594二抗（红色）37℃避光孵育1h
第三染色轮（靶抗原C）
5. 一抗C（山羊源）4℃孵育过夜
6. Alexa Fluor® 647二抗（远红外）37℃避光孵育1h
终处理
7. DAPI核染（蓝色）→ ProLong® Diamond抗淬灭封片
8. 共聚焦显微镜层扫成像（Z-stack 3D重建）
关键参数：
抗体宿主：兔/鼠/山羊三独立系统
荧光通道：488nm（绿）/594nm（红）/647nm（远红）
层扫厚度：0.5-1μm/层
样本与运输特殊要求
| 样本类型 | 特殊要求 | 运输方式 |
|---|---|---|
| 组织 | ≤3mm³（防自发荧光） | 避光常温 |
| 冰冻切片 | OCT包埋 | 干冰运输 |
| 石蜡切片 | 防脱片处理（多聚赖氨酸） | 避光常温 |
| 活细胞 | 预染CellTracker™定位 | 恒温培养瓶运输 |
三标质控核心条款
抗体验证铁律
预实验需提供：
✓ 三阳性组织（三种抗原共表达）
✓ 单阳性对照x3（各抗原独立表达）
✓ 阴性对照验证报告包含：
光谱交叉率（需<5%）
抗体交叉结合测试
不可突破的限制
仅支持共聚焦层扫成像（常规荧光拍照无法分离三通道信号）
一抗宿主必须不同（推荐兔/鼠/山羊组合）
禁用发射光谱邻近染料（如FITC与TRITC）
服务承诺范围
预实验周期：28天（含光谱校准）
不保证事项：
✓ 弱表达抗原的共定位量化
✓ 自发荧光组织的信噪比
✓ 石蜡样本的三维重建精度
客户专属服务与福利：
便捷取样服务：
武汉地区客户： 享受免费上门取样服务，无最低样本数量限制，为您提供最大便利。
外地客户： 可将样本通过顺丰快递邮寄至我司（运费可选择到付，由我司全额承担）。
价格优惠： 对于样本量较大的项目，我们提供极具竞争力的梯度定价，欢迎详询洽谈，为您量身定制最优方案。
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免疫荧光三标
