免疫荧光四标
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免疫荧光四标

免疫荧光四标

  • 产品价格: 300.00

  • 产品规格: 

  • 交付周期: 5天内

  • 取样/货号: 上门取样/邮寄样本

  • 品牌名称: 艾普蒂生物




免疫荧光四标检测 (Immunofluorescence Quadruple Labeling)
免疫荧光四标技术通过四种光谱分离的荧光标记系统,在单张样本上实现四种靶蛋白的亚细胞级共定位分析。结合DAPI核染色,可解析复杂蛋白质互作网络,为肿瘤微环境、神经环路等多靶点研究提供关键技术支持。

四标技术核心突破与限制

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四标标准化流程(分轮次避光链式操作)

预优化处理

  1. 活体灌注固定(优先) / OCT包埋冰冻切片

  2. 多级抗原修复(酶解+热诱导)

  3. 0.3% Triton X-100通透 + 10%种属血清封闭

分轮染色(每轮严格清洗)

轮次靶抗原一抗宿主荧光染料激发/发射波长
第一轮AntigenAAlexa Fluor® 488488/519 nm
第二轮AntigenB小鼠Alexa Fluor® 594590/617 nm
第三轮AntigenC山羊Alexa Fluor® 647650/668 nm
第四轮AntigenDAlexa Fluor® 790782/805 nm

终处理

  • DAPI核染(15min)

  • ProLong™ Diamond抗淬灭封片

  • 24h避光固化 → 共聚焦显微镜光谱拆分层扫(Z-stack 0.5μm/层)

不可妥协的样本要求

样本类型处理规范拒收情形
组织活体灌注固定自发荧光强的肝/肺组织
冰冻切片≤5μm厚度+OCT包埋冰晶损伤样本
细胞爬片爬片密度≤50%重叠细胞
活细胞转染荧光报告基因未转染对照组缺失

四标质控核心条款

  1. 抗体系统验证

    • 预实验需提供:
      ✓ 四阳性对照样本(需病理确认共表达)
      ✓ 单阳性对照x4(独立表达样本)
      ✓ 空白对照

    • 验证周期:35天(含光谱校准+交叉反应测试)

  2. 成像强制规范

    • 仅支持以下设备
      ✓ Zeiss LSM 980 with 34谱线检测器
      ✓ Nikon A1R HD25光谱分光系统

    • 禁用常规宽场荧光显微镜

  3. 严格免责声明

    • 不保证事项:
      ✓ 发射波长<650nm染料的串扰率(尤其红/粉组合)
      ✓ 石蜡样本>2种抗原的共定位精度
      ✓ 活细胞四标存活率(<30%正常)

最终交付说明

  1. 原始数据含:

    • 四通道分色Z-stack图像

    • 光谱拆分验证报告

    • 三维共定位量化数据(Pearson系数)

  2. 交付周期:正式实验启动后45工作日

  3. 补充条款:若需五标及以上方案,需定制量子点技术



客户专属服务与福利:

  • 便捷取样服务:

    • 武汉地区客户: 享受免费上门取样服务,无最低样本数量限制,为您提供最大便利。

    • 外地客户: 可将样本通过顺丰快递邮寄至我司(运费可选择到付,由我司全额承担)。

  • 价格优惠: 对于样本量较大的项目,我们提供极具竞争力的梯度定价,欢迎详询洽谈,为您量身定制最优方案。

  • 贴心客户关怀: 成为我司尊贵客户,即可不定期享受我们精心准备的暖心福利,如:精致茶点(零食、水果)、提神饮品(奶茶、咖啡)及季节性冷饮(雪糕)等,让科研与合作之旅更添一份温馨与惊喜。

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