免疫荧光四标
产品价格: 300.00
产品规格: 张
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品牌名称: 艾普蒂生物
免疫荧光四标检测 (Immunofluorescence Quadruple Labeling)
免疫荧光四标技术通过四种光谱分离的荧光标记系统,在单张样本上实现四种靶蛋白的亚细胞级共定位分析。结合DAPI核染色,可解析复杂蛋白质互作网络,为肿瘤微环境、神经环路等多靶点研究提供关键技术支持。
四标技术核心突破与限制
四标标准化流程(分轮次避光链式操作)
预优化处理
活体灌注固定(优先) / OCT包埋冰冻切片
多级抗原修复(酶解+热诱导)
0.3% Triton X-100通透 + 10%种属血清封闭
分轮染色(每轮严格清洗)
轮次 | 靶抗原 | 一抗宿主 | 荧光染料 | 激发/发射波长 |
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第一轮 | AntigenA | 兔 | Alexa Fluor® 488 | 488/519 nm |
第二轮 | AntigenB | 小鼠 | Alexa Fluor® 594 | 590/617 nm |
第三轮 | AntigenC | 山羊 | Alexa Fluor® 647 | 650/668 nm |
第四轮 | AntigenD | 鸡 | Alexa Fluor® 790 | 782/805 nm |
终处理
DAPI核染(15min)
ProLong™ Diamond抗淬灭封片
24h避光固化 → 共聚焦显微镜光谱拆分层扫(Z-stack 0.5μm/层)
不可妥协的样本要求
样本类型 | 处理规范 | 拒收情形 |
---|---|---|
组织 | 活体灌注固定 | 自发荧光强的肝/肺组织 |
冰冻切片 | ≤5μm厚度+OCT包埋 | 冰晶损伤样本 |
细胞爬片 | 爬片密度≤50% | 重叠细胞 |
活细胞 | 转染荧光报告基因 | 未转染对照组缺失 |
四标质控核心条款
抗体系统验证
预实验需提供:
✓ 四阳性对照样本(需病理确认共表达)
✓ 单阳性对照x4(独立表达样本)
✓ 空白对照验证周期:35天(含光谱校准+交叉反应测试)
成像强制规范
仅支持以下设备:
✓ Zeiss LSM 980 with 34谱线检测器
✓ Nikon A1R HD25光谱分光系统禁用常规宽场荧光显微镜
严格免责声明
不保证事项:
✓ 发射波长<650nm染料的串扰率(尤其红/粉组合)
✓ 石蜡样本>2种抗原的共定位精度
✓ 活细胞四标存活率(<30%正常)
最终交付说明:
原始数据含:
四通道分色Z-stack图像
光谱拆分验证报告
三维共定位量化数据(Pearson系数)
交付周期:正式实验启动后45工作日
补充条款:若需五标及以上方案,需定制量子点技术
客户专属服务与福利:
便捷取样服务:
武汉地区客户: 享受免费上门取样服务,无最低样本数量限制,为您提供最大便利。
外地客户: 可将样本通过顺丰快递邮寄至我司(运费可选择到付,由我司全额承担)。
价格优惠: 对于样本量较大的项目,我们提供极具竞争力的梯度定价,欢迎详询洽谈,为您量身定制最优方案。
贴心客户关怀: 成为我司尊贵客户,即可不定期享受我们精心准备的暖心福利,如:精致茶点(零食、水果)、提神饮品(奶茶、咖啡)及季节性冷饮(雪糕)等,让科研与合作之旅更添一份温馨与惊喜。
免疫荧光四标