艾普蒂枯草芽孢杆菌表达系统：革兰氏阳性菌高效分泌表达的工业级解决方案

一、技术优势：突破传统限制的五大核心能力

基于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的天然分泌特性，艾普蒂开发出技术平台，为工业酶、抗菌肽等蛋白提供高效经济的生产方案。

1. 超强分泌能力

● 胞外分泌效率达80%以上，目标蛋白直接释放至培养基

● 最高发酵密度达50 g/L（DCW），重组蛋白产量＞5 g/L

2. 快速生产周期

● 从基因构建到发酵完成仅需7-10天

● 分批补料发酵周期控制在24-36小时

3. 严格生物安全

● 非致病性GRAS菌株（通过FDA 21 CFR 184认证）

● 无内毒素风险，产物可直接用于食品级应用

4. 低成本规模化

● 培养基成本为大肠杆菌系统的1/3

● 15吨发酵罐单批次产量可满足吨级需求

5. 复杂蛋白适配

● 成功表达含8个二硫键的抗菌肽

● 分泌蛋白正确折叠率＞90%

二、服务流程：从基因设计到规模放大的全链条开发

艾普蒂建立标准化开发路径，项目成功率维持行业领先的85%以上：

‌阶段1：基因优化与载体构建（3-5天）‌

• 密码子优化覆盖15种枯草芽孢杆菌工业菌株

• 启动子库选择（P43、Pgrac、PamyQ等）‌

阶段2：转化与菌株筛选（5-7天）‌

• 高效电转化效率＞1×10⁶ CFU/μg DNA

• 双重抗性标记快速筛选系统‌

阶段3：发酵工艺开发（7-10天）‌

• 摇瓶至500L发酵罐的逐级放大

• 在线监测溶解氧、pH、菌体密度等关键参数‌

阶段4：产物收获与纯化（3-5天）‌

• 连续流离心技术处理高密度发酵液

• 三步纯化工艺：超滤浓缩→离子交换→凝胶过滤‌

阶段5：质量验证与交付‌

• 基础检测：SDS-PAGE纯度分析、浓度测定

• 高级检测：质谱分子量验证、生物活性检测

三、应用领域：覆盖工业与医药的全场景需求

1. 科研蛋白生产

● 提供胞内/分泌两种表达模式

● 冻干粉制剂常温保存稳定性＞18个月

四、成功案例：全球客户的工业化验证

科研机构合作

• 中国农业科学院饲料研究所

● 需求：开发耐高温β-甘露聚糖酶

● 成果：酶活达15,000 U/mg，80℃半衰期＞2小时

● 技术成果获国家科技进步二等奖

五、质量体系：从菌种到成品的全程管控

菌种管理

● 主细胞库通过全基因组测序验证

● 每月进行遗传稳定性测试

过程控制

● 关键参数标准偏差控制：发酵液pH波动＜±0.2

○ 温度偏差＜±0.5℃

交付标准

● 基础级：纯度＞85%（SDS-PAGE），酶活误差＜±5%

● 食品级：符合ISO 22000标准，提供致敏性测试报告

● 医药级：满足EP/USP标准，完成宿主蛋白残留检测

客户权益保障

● 工艺转移：提供菌株保藏与技术人员培训

● 售后支持：12个月免费技术咨询

‌为什么选择艾普蒂？‌

● 完成400+枯草芽孢杆菌开发项目

● 服务全球25个国家客户

● 工业化放大成功率＞95%

● 技术团队平均行业经验12年

‌立即行动‌

● 提交蛋白序列信息，24小时内获取工艺可行性分析。

● 免费信号肽筛选服务

● 优先获得中试生产档期