免疫荧光五标
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免疫荧光五标

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  • 产品价格: 500.00

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  • 交付周期: 5天内

  • 取样/货号: 上门取样/邮寄样本

  • 品牌名称: 艾普蒂生物




免疫荧光五标检测 (5-plex Immunofluorescence Labeling)

突破性实现单样本内五种靶蛋白的亚细胞级共定位分析,结合近红外光谱技术与多宿主抗体系统,为肿瘤免疫微环境、神经环路多靶点调控等复杂机制研究提供终极解决方案。


五标技术核心壁垒与突破

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五标标准化流程(分轮次链式操作)

样本预处理

  • 活体灌注固定(优先)或 OCT包埋冰冻切片(≤5μm)

  • 多级抗原修复(酶解+热诱导高压修复)

  • 0.1% Tween-20通透 + 多重血清封闭(含5% BSA)

分轮染色(每轮严格洗脱抗体复合物)

轮次靶抗原一抗宿主荧光染料激发/发射波长
1AntigenAAlexa Fluor® 488488/519 nm
2AntigenB小鼠Alexa Fluor® 594590/617 nm
3AntigenC山羊Alexa Fluor® 647650/668 nm
4AntigenDAlexa Fluor® 790782/805 nm
5AntigenE骆驼Alexa Fluor® Plus 810808/834 nm

终处理

  1. DAPI核染(10min)

  2. ProLong™ Diamond抗淬灭封片(避光固化24h)

  3. 共聚焦显微镜层扫成像(Z-stack 0.3μm/层 + 光谱拆分)


不可妥协的样本要求

样本类型接受标准拒收情形
组织活体灌注固定 + ≤3mm³自发荧光组织(肝/肺/脂肪)
冰冻切片OCT包埋 + 速冻-196℃冰晶损伤
活细胞转染荧光报告基因密度>60%的细胞

⚠️石蜡切片常温运输


五标质控核心条款

1. 抗体验证铁律

  • 预实验样本要求

    • 五阳性对照(病理确认共表达)

    • 单阳性对照×5(独立表达)

    • 空白对照(无荧光背景)

  • 验证周期42天(含光谱校准+交叉反应测试)

2. 成像设备白名单

仅限以下设备执行:

  • Zeiss LSM 980(配备34通道GaAsP检测器)

  • Nikon A1R HD25(光谱分光精度≤2nm)

3. 严格免责声明

不保证以下情形:

  • 波长<650nm通道的串扰率(尤其红/粉组合)

  • 石蜡样本中>3种抗原的共定位精度

  • 活细胞染色后存活率(预期<20%)


服务交付标准

交付内容周期补充条款
五通道分色Z-stack图像45工作日含3D重构视频
光谱交叉验证报告
串扰率≤5%
共定位量化分析(Manders系数)
需提供共表达区域ROI

客户专属服务与福利:

  • 便捷取样服务:

    • 武汉地区客户: 享受免费上门取样服务,无最低样本数量限制,为您提供最大便利。

    • 外地客户: 可将样本通过顺丰快递邮寄至我司(运费可选择到付,由我司全额承担)。

  • 价格优惠: 对于样本量较大的项目,我们提供极具竞争力的梯度定价,欢迎详询洽谈,为您量身定制最优方案。

  • 贴心客户关怀: 成为我司尊贵客户,即可不定期享受我们精心准备的暖心福利,如:精致茶点(零食、水果)、提神饮品(奶茶、咖啡)及季节性冷饮(雪糕)等,让科研与合作之旅更添一份温馨与惊喜。

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