免疫荧光五标
产品价格: 500.00
产品规格: 张
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品牌名称: 艾普蒂生物
免疫荧光五标检测 (5-plex Immunofluorescence Labeling)
突破性实现单样本内五种靶蛋白的亚细胞级共定位分析,结合近红外光谱技术与多宿主抗体系统,为肿瘤免疫微环境、神经环路多靶点调控等复杂机制研究提供终极解决方案。
五标技术核心壁垒与突破
五标标准化流程(分轮次链式操作)
样本预处理
活体灌注固定(优先)或 OCT包埋冰冻切片(≤5μm)
多级抗原修复(酶解+热诱导高压修复)
0.1% Tween-20通透 + 多重血清封闭(含5% BSA)
分轮染色(每轮严格洗脱抗体复合物)
轮次 | 靶抗原 | 一抗宿主 | 荧光染料 | 激发/发射波长 |
---|---|---|---|---|
1 | AntigenA | 兔 | Alexa Fluor® 488 | 488/519 nm |
2 | AntigenB | 小鼠 | Alexa Fluor® 594 | 590/617 nm |
3 | AntigenC | 山羊 | Alexa Fluor® 647 | 650/668 nm |
4 | AntigenD | 鸡 | Alexa Fluor® 790 | 782/805 nm |
5 | AntigenE | 骆驼 | Alexa Fluor® Plus 810 | 808/834 nm |
终处理
DAPI核染(10min)
ProLong™ Diamond抗淬灭封片(避光固化24h)
共聚焦显微镜层扫成像(Z-stack 0.3μm/层 + 光谱拆分)
不可妥协的样本要求
样本类型 | 接受标准 | 拒收情形 |
---|---|---|
组织 | 活体灌注固定 + ≤3mm³ | 自发荧光组织(肝/肺/脂肪) |
冰冻切片 | OCT包埋 + 速冻-196℃ | 冰晶损伤 |
活细胞 | 转染荧光报告基因 | 密度>60%的细胞 |
⚠️石蜡切片常温运输
五标质控核心条款
1. 抗体验证铁律
预实验样本要求:
五阳性对照(病理确认共表达)
单阳性对照×5(独立表达)
空白对照(无荧光背景)
验证周期:42天(含光谱校准+交叉反应测试)
2. 成像设备白名单
仅限以下设备执行:
Zeiss LSM 980(配备34通道GaAsP检测器)
Nikon A1R HD25(光谱分光精度≤2nm)
3. 严格免责声明
不保证以下情形:
波长<650nm通道的串扰率(尤其红/粉组合)
石蜡样本中>3种抗原的共定位精度
活细胞染色后存活率(预期<20%)
服务交付标准
交付内容 | 周期 | 补充条款 |
---|---|---|
五通道分色Z-stack图像 | 45工作日 | 含3D重构视频 |
光谱交叉验证报告 | 串扰率≤5% | |
共定位量化分析(Manders系数) | 需提供共表达区域ROI |
客户专属服务与福利:
便捷取样服务:
武汉地区客户: 享受免费上门取样服务,无最低样本数量限制,为您提供最大便利。
外地客户: 可将样本通过顺丰快递邮寄至我司(运费可选择到付,由我司全额承担)。
价格优惠: 对于样本量较大的项目,我们提供极具竞争力的梯度定价,欢迎详询洽谈,为您量身定制最优方案。
贴心客户关怀: 成为我司尊贵客户,即可不定期享受我们精心准备的暖心福利,如:精致茶点(零食、水果)、提神饮品(奶茶、咖啡)及季节性冷饮(雪糕)等,让科研与合作之旅更添一份温馨与惊喜。
免疫荧光五标